茶葉抗病毒研究進(jìn)展

由浙江大學(xué)茶學(xué)系屠幼英教授主編，世界圖書(shū)出版社出版的《茶與健康》教材盡管出版已經(jīng)有10余年，印刷12次，但是在當(dāng)前冠狀病毒盛行之時(shí)，將本書(shū)中的“茶抗病毒作用”相關(guān)章節(jié)與大家分享，可為大家預(yù)防病毒的傳染提供一定的參考。

 茶抗病毒作用 

一、茶抗流感病毒的作用

 1.流感概述 

（1）流感的定義
流行性感冒簡(jiǎn)稱流感，是由流感病毒引起的一種常見(jiàn)的急性呼吸道傳染病，以冬春季多見(jiàn)，臨床以高熱、乏力、頭痛、全身酸痛等全身中毒癥狀重而呼吸道其他癥狀較輕為特征，流感病毒容易發(fā)生變異，傳染性強(qiáng)，常引起流感的流行。

（2）流感病原學(xué) 

流感病毒屬于正粘病毒科，球型，直徑80~120 nm，基因組為RNA病毒。其特點(diǎn)是容易發(fā)生變異。

流感病毒電鏡觀察圖 

流感分為甲乙丙三型（或ABC三型）。

 A型為最常見(jiàn)的流感，可廣泛流行及人畜共患，例如1997年在香港肆虐的禽流感，以致政府須屠宰150萬(wàn)只雞。A型病毒可再分為A1、A2型，并按結(jié)構(gòu)再劃分，例如A型H5N1毒株（香港禽流感病毒）、A型H3N2（1995年在武漢發(fā)生）、A型H1N1（1995年在德國(guó)發(fā)生）等。病毒因不定時(shí)的基因突變而衍生新品種。B型也會(huì)流行，癥狀較A型輕，無(wú)再分亞型。C型主要以散發(fā)病例出現(xiàn)；無(wú)再分亞型。 流感病毒有一層脂質(zhì)囊膜，膜上有蛋白質(zhì)，是由血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）組成，均具有抗原性。A型流感病毒變異是常見(jiàn)的自然現(xiàn)象，主要是H和N的變異。 一般感染人類的流感病毒的血凝素有H1、H2和H3 3種。H4至H14則只會(huì)感染人類以外的其他動(dòng)物，如雞、豬及鳥(niǎo)類。N只有N1及N2兩種。流感病毒不耐熱，100℃1分鐘或56℃30分鐘滅活，對(duì)常用消毒劑敏感（1%甲醛、過(guò)氧乙酸、含氯消毒劑等），對(duì)紫外線敏感，耐低溫和干燥，真空干燥或—20℃以下仍可存活。 

（3）流感的流行病學(xué) 

流感患者及隱性感染者為主要傳染源。發(fā)病后1~7天有傳染性，病初2~3天傳染性最強(qiáng)。豬、牛、馬等動(dòng)物可能傳播流感。

 傳播途徑以空氣飛沫傳播為主，流感病毒在空氣中大約存活半小時(shí)污染的日用品。

 人群普遍易感，病后有一定的免疫力。三型流感之間、甲型流感不同亞型之間無(wú)交叉免疫，可反復(fù)發(fā)病。

 流感的流行特征有下列3點(diǎn)：

1）流行特點(diǎn)：突然發(fā)生，迅速蔓延，2~3周達(dá)高峰，發(fā)病率高，流行期短，為6~8周，常沿交通線傳播。

2）一般規(guī)律：先城市后農(nóng)村，先集體單位，后分散居民。甲型流感常引起爆發(fā)流行，甚至是世界大流行，2~3年發(fā)生小流行1次，根據(jù)世界上已發(fā)生的4次大流行情況分析，一般10~15年發(fā)生1次大流行。乙型流感呈爆發(fā)或小流行，丙型以散發(fā)為主。

3）流行季節(jié)：四季均可發(fā)生，以冬春季為主。南方在夏秋季也可見(jiàn)到流感流行。

2.茶對(duì)流感防治機(jī)理和療效

據(jù)日本在2009年8月1日《朝日新聞》報(bào)道，日本研究人員利用一種綠茶提取物開(kāi)發(fā)出一種新型抗流感藥物，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，這種藥物抑制流感病毒感染的效果可媲美抗流感藥物達(dá)菲。此前人們已知道EGCG具有抑制病毒的作用，但直接飲用綠茶，EGCG被體內(nèi)利用量很微量。為此，研究人員讓EGCG與一種脂肪酸相結(jié)合，使其在體內(nèi)不被分解。研究人員把修飾后的EGCG混入季節(jié)性流感或禽流感病毒中，再注射入狗的腎臟細(xì)胞，研究病毒的感染能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，修飾后的EGCG確實(shí)能防止病毒入侵細(xì)胞，即使病毒成功入侵，也能抑制它在細(xì)胞中的增殖。

早在1990年Nakayama M等用繁殖在11日齡雞胚上的中國(guó)四川2/87流感病毒A、前蘇聯(lián)100/83流感病毒B和Madin-Dary犬腎（MDCK）細(xì)胞作材料，研究紅茶提取液（20g紅茶浸泡于80mL磷酸緩沖液中）對(duì)流感病毒A或B的抑制作用。11μL/mL茶提取液和流感病毒混合60min，即可抑制流感病毒A或B在MDCK細(xì)胞上吸附，其抑制率都在80%以上。病毒和紅茶提取液短時(shí)間接觸，也能降低病毒對(duì)MDCK細(xì)胞的侵染程度。用茶提取液50μL/mL濃度處理MDCK細(xì)胞，再用流感病毒感染，其感染抑制率為85%，但當(dāng)MDCK細(xì)胞感染病毒后，無(wú)抑制效果。這可看出，紅茶提取物對(duì)流感病毒A或B只有預(yù)防效果，感染后無(wú)治療作用。

 研究茶多酚對(duì)流感病毒A3直接滅活作用實(shí)驗(yàn)表明，在3.12~50μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，流感病毒A3在混有茶多酚的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，茶多酚具有顯著降低病毒活性和抑制病毒增殖的作用；茶多酚對(duì)流感病毒A3的治療作用實(shí)驗(yàn)表明茶多酚在6.25~50μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有顯著的抗流感病毒A3的作用，且其作用隨藥物濃度的增加而相應(yīng)增強(qiáng)。說(shuō)明茶多酚有很好的體外抗流感病毒A3的作用。 Song J等（2005年）研究表明，EGCG和ECG在MDCK細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)流感病毒的復(fù)制有抑制活性，而且對(duì)包括A/H1N1、A/H3N2和B病毒在內(nèi)的各種流感亞型病毒都有活性。對(duì)于甲型流感病毒，EGCG、ECG和EGC的IC50分別為22~28μmol/L、22~40μmol/L、309~318μmol/L，同時(shí)EGCG和ECG都有凝集活性，它們對(duì)各種亞型病毒的凝集活性都不同，而且EGCG的凝集活性相對(duì)更高。定量RT-PCR分析表明，在高濃度條件下，EGCG和ECG抑制MDCK細(xì)胞中病毒RNA的合成，而EGC沒(méi)有此活性；與此類似，EGCG和ECG比EGC表現(xiàn)有更高的神經(jīng)胺酶抑制活性。說(shuō)明兒茶素類中3-沒(méi)食子酰基在抗病毒中起到重要作用，而2位三羥基苯中的5-羥基起次要的作用；由凝集反應(yīng)表明，兒茶素抗病毒活性不僅僅由凝集活性介導(dǎo)，而且還與改變病毒膜的物理性質(zhì)有關(guān)。

對(duì)老年群體使用含有茶兒茶素的漱口水預(yù)防流感的研究表明，使用了含茶兒茶素漱口水的群體感染流感的幾率（1.3%）遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于不使用含茶兒茶素漱口水的群體感染流感的幾率（10%）。日本昭和大學(xué)的研究人員發(fā)現(xiàn)，茶葉中的兒茶素具有抑制流感病毒活性的作用，堅(jiān)持用茶水漱口可以有效地預(yù)防流感。流感主要是病毒附著在鼻子和嗓子中突起的黏膜細(xì)胞上不斷增殖而致病的。經(jīng)常用茶水漱口，兒茶素能夠覆蓋在突起的黏膜細(xì)胞上，防止流感病毒和黏膜結(jié)合，并殺死病毒。研究結(jié)果表明，烏龍茶、紅茶和日本茶中都含有兒茶素，綠茶預(yù)防流感的效果最好。在一個(gè)小學(xué)進(jìn)行的對(duì)比試驗(yàn)也表明，堅(jiān)持用綠茶水漱口學(xué)生患流感的人數(shù)，要比不用綠茶水的人數(shù)少得多。

 老年人對(duì)流行性感冒疫苗的免疫響應(yīng)減弱，導(dǎo)致流行性感冒病毒感染發(fā)病率高。用感染流行性感冒病毒的小鼠實(shí)驗(yàn)表明，同時(shí)口服L-胱氨酸和L-茶氨酸可以提高特異性抗原免疫球蛋白的產(chǎn)生。將療養(yǎng)院的老年受試者分成2組，在免疫接種之前分別口服L-胱氨酸和L-茶氨酸（實(shí)驗(yàn)組，n=32）或安慰劑（對(duì)照組，n=33），口服14天后接種流行性感冒病毒疫苗，接種后4星期檢測(cè)，3種病毒（A/New Caledonia [H1N1]，A/New York [H3N2]和B/Shanghai）都能造成血凝集抑制（HI）滴度提高，兩組之間沒(méi)有顯著差異；但層狀分析（Stratified analysis）顯示，血清總蛋白和血紅蛋白低的受試者中，實(shí)驗(yàn)組的血清轉(zhuǎn)化率顯著高于對(duì)照組。表明疫苗接種前同時(shí)口服L-胱氨酸和L-茶氨酸有助于增強(qiáng)血清總蛋白和血紅蛋白低的老年人對(duì)流行性感冒病毒疫苗的免疫響應(yīng)。

二、茶抗SARS病毒的作用

嚴(yán)重急性呼吸綜合征（Severe acute respiratory syndrome, SARS），即傳染性非典型肺炎（Infectious atypical pneumonia，非典）。本病是在2002年底至2003年初首先在廣東地區(qū)出現(xiàn)的一種新的呼吸道傳染病，在經(jīng)歷了2個(gè)多月的始發(fā)期后，擴(kuò)散到我國(guó)內(nèi)地24個(gè)省、自治區(qū)、直轄市，在全球共波及亞洲、美洲、歐洲等33個(gè)國(guó)家和地區(qū)。2003年4月16日WHO宣布本病的病原體是一種新型的冠狀病毒變異體，并命名為SARS冠狀病毒。SARS病毒呈球形，形似皇冠，直徑80~140 nm，外周圍繞20~40 nm復(fù)合表面突起，未見(jiàn)HE糖蛋白突起。
3CL蛋白酶被認(rèn)為是SARS-CoV在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的關(guān)鍵。人們從天然產(chǎn)物信息庫(kù)的72種組分中篩選出有抗3CL蛋白酶活性的組分，發(fā)現(xiàn)鞣酸和TF2B有活性，IC50為7μmol/L，而這兩種組分是屬于茶葉中的天然茶多酚。進(jìn)一步對(duì)綠茶、烏龍茶、普洱茶及紅茶提取物進(jìn)行3CL蛋白酶抑制活性研究，發(fā)現(xiàn)來(lái)自普洱茶和紅茶的提取物比綠茶和烏龍茶活性高。對(duì)一些茶內(nèi)的已知成分進(jìn)行抑制3CL蛋白酶抑制活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)咖啡堿、EGCG、EC、C、ECG、EGC這些成分都沒(méi)有抑制活性，而只有TF3是3CL蛋白酶抑制劑，表明茶葉中的茶黃素TF3能夠抑制3CL蛋白酶活性。

2003年《美國(guó)科學(xué)院學(xué)報(bào)》報(bào)道，茶葉的茶氨酸可使人體抵御病毒的感染能力增強(qiáng)5倍。茶氨酸在人體肝臟內(nèi)分解為乙胺，而乙胺又能調(diào)動(dòng)名為“Vγ2Vδ2 T細(xì)胞”的人體血液免疫細(xì)胞，再由T形細(xì)胞促進(jìn)“IFN-γ干擾素”的分泌，形成人體抵御感染的“化學(xué)防線”，做出抵御外界侵害的反應(yīng)，抵抗病毒、細(xì)菌以及真菌。研究人員指出，每天喝5小杯茶，茶氨酸的攝人量就足以幫助人體明顯加強(qiáng)對(duì)于特定細(xì)菌感染的抵御能力，連續(xù)兩周飲用茶飲料能夠增加對(duì)于細(xì)菌的抵抗力，但是兩周飲用咖啡并沒(méi)有相同的效果。

此外，茶葉中大量的茶多酚具有抗氧化作用，人體中如果含有一定量的抗氧化劑，就能增強(qiáng)免疫力。茶葉中還有維生素C、維生素E、微量元素鋅和硒，而這些元素都是醫(yī)學(xué)上用來(lái)提高人體免疫力的有效物質(zhì)。當(dāng)然，不是“非典”來(lái)了我們才開(kāi)始喝茶，就能馬上見(jiàn)效提高抵抗力，要經(jīng)常喝茶才能提高抵抗力。

三、茶抗艾滋病病毒的作用

人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV），顧名思義它會(huì)造成人類免疫系統(tǒng)的缺陷。1981年，人類免疫缺陷病毒在美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)。它是一種感染人類免疫系統(tǒng)細(xì)胞的慢病毒（Lentivirus），屬反轉(zhuǎn)錄病毒的一種。至今無(wú)有效療法的致命性傳染病。該病毒破壞人體的免疫能力，導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的失去抵抗力，而導(dǎo)致各種疾病及癌癥得以在人體內(nèi)生存，發(fā)展到最后，導(dǎo)致艾滋病（獲得性免疫缺陷綜合征）。 有研究表明，兒茶素和綠茶提取物對(duì)HIV病毒逆轉(zhuǎn)錄酶具有強(qiáng)的抑制用。H Nakane和K Ono等的研究結(jié)果表明，ECG、EGCG對(duì)HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的50%抑制濃度分別是0.017μg/mL和0.012μg/mL，對(duì)DNA聚合酶類50%抑制濃度分別是0.9~0.13μg/mL和0.6~0.12μg/mL。茶黃素及其沒(méi)食子酸酯對(duì)HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶活性50%抑制濃度分別為0.5μg/mL和0.1μg/mL。茶黃素、茶黃素單沒(méi)食子酸酯A、茶黃素單沒(méi)食子酸酯B和茶黃素雙沒(méi)食子酸酯對(duì)HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制常數(shù)分別為0.49、0.032、0.023、0.023 μmol/L。表明沒(méi)食子酸基團(tuán)的存在可提高茶黃素的抑制效應(yīng)。Tao P Z用EGCG、ECG和EGC抑制艾滋病毒（HIV-I-RT）也得到了類似的結(jié)果。 

CD4細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)中的一種重要免疫細(xì)胞，CD4主要表達(dá)于輔助T（Th）細(xì)胞，是Th細(xì)胞TCR識(shí)別抗原的供受體，與MHCⅡ類分子的非多肽區(qū)結(jié)合，參與Th細(xì)胞TCR識(shí)別抗原的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，然而CD4也是艾滋病病毒（HIV）的受體，即是艾滋病病毒攻擊的對(duì)象。HIV外層囊膜系雙層脂質(zhì)蛋白膜，其中嵌有g(shù)p120和gp41，分別組成刺突和跨膜蛋白。通過(guò)HIV囊膜蛋白gp120與細(xì)胞膜上CD4結(jié)合后由gp41介導(dǎo)使病毒穿入易感細(xì)胞內(nèi)，造成免疫淋巴細(xì)胞破壞。綠茶提取物中的主成分EGCG能夠與CD4結(jié)合，從而降低細(xì)胞表面CD4的表達(dá)，競(jìng)爭(zhēng)性抑制了艾滋病病毒膜糖蛋白gp120與CD4的結(jié)合，因而保護(hù)了部分免疫淋巴細(xì)胞免受攻擊。KawaiK等抽取正常志愿者的靜脈血，通過(guò)淋巴細(xì)胞密度梯度離心來(lái)獲取外周血CD4+T細(xì)胞，并且用流式細(xì)胞儀分析其細(xì)胞表面分子。他們用蛋白雜交技術(shù)確定CD4總量沒(méi)有變，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)到EGCG能與抗CD4抗體相競(jìng)爭(zhēng)，異硫氰酸熒光素共軛結(jié)合gp120后用流式細(xì)胞儀分析得出EGCG能干擾gp120與CD4結(jié)合，由此看出EGCG能夠降低細(xì)胞表面CD4的表達(dá)。

四、茶抗腺病毒和人類皰疹病毒的作用

一些科學(xué)家還對(duì)綠茶提取物抗其他的病毒性疾病進(jìn)行了研究報(bào)道。Weber J等在2003年就研究報(bào)道綠茶兒茶素對(duì)腺病毒的抑制作用，他們認(rèn)為抗病毒機(jī)理有多方面，包括細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外，而病毒蛋白酶是綠茶提取物的主成分EGCG的作用目標(biāo)。Chang等也是在2003年報(bào)道了綠茶提取物的主要成分EGCG對(duì)人EB病毒的抑制作用，他們研究表明EGCG能抑制EB病毒某些裂解蛋白質(zhì)的表達(dá)，EGCG作用于病毒裂解循環(huán)周期的前早期基因的表達(dá)，因此抑制病毒的裂解級(jí)聯(lián)反應(yīng)，從而阻止病毒增殖。綠茶提取物干擾病毒生長(zhǎng)周期的少數(shù)程序，從而阻斷了病毒核酸的復(fù)制，抑制病毒蛋白的表達(dá)，起到了抗病毒的作用。

（資料來(lái)源：中國(guó)茶葉；作者：屠幼英、李偉）